紫外分光光度計測定樣品步驟
更新時間：2018-07-31
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1、首先，知道所需要測量物質(zhì)的特征吸收波長是多少，這個可在國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或其他相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或方法。例如測量總氮的話，就需要220和275nm這2個波長，所以必須買紫外的光度計，并且盡量帶雙波長測定功能，例如測總磷是697nm，只需買臺可見光度計就可以了。
2、第二步：知道所測量的物質(zhì)的實(shí)驗方法，需要哪些儀器和設(shè)備，還有玻璃器皿等，同時還有比較完成測量所需要的所有化學(xué)試劑等。這個可以在標(biāo)準(zhǔn)或?qū)嶒灧椒ㄖ姓业?，基本在互?lián)網(wǎng)上都可以找到電子版的測量方法。
3、第三步：配置好所需測量物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)濃度溶液，一般是5~8個標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度建議從高到低，建議每個不同濃度貼上標(biāo)簽，以防順序搞錯。注意，部分實(shí)驗需要往標(biāo)準(zhǔn)溶液中加顯色劑之后才可以用光度計進(jìn)行測量。
4、第四步：設(shè)置好光度計的測量波長，這就需要熟悉光度計的基本操作，一般測量物質(zhì)的濃度都是用的標(biāo)準(zhǔn)曲線法，就是對應(yīng)光度計中的定量測量功能。具體操作時步，把儀器的波長調(diào)整到我們所需要的波長，例如測量總磷直接把波長走到697nm，之后放入裝好蒸餾水的比色皿到樣品室做空白，就是熟稱的調(diào)零。第三部把標(biāo)準(zhǔn)溶液放入樣品室，依次測量他們的吸光度，儀器一般會自動記錄之后就會給出標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，實(shí)驗完畢。如果儀器不能直接記錄吸光度，可以先記在筆記本上，之后用excel軟件進(jìn)行計算標(biāo)準(zhǔn)曲線。判斷做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線是否能用，看哪個R值即那個相關(guān)系數(shù)，一般少做出0.999就可以用了，差一點(diǎn)的儀器也可以做出0.99.
5、第五步：把未知樣品放入樣品室就可以直接測量出樣品濃度。
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